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      GPI錨定的抗EGFR納米抗體可促進胞外囊泡的腫瘤靶向性

      很多從事外泌體治療研究的小伙伴們都在為細胞外囊泡和外泌體的靶向性而煩惱,來自荷蘭烏得勒支大學醫學中心的研究者們最近開發了一種新的方法使EVs具有很好的靶向特性。做外泌體治療研究的同行們可以參考。


      背景:胞外囊泡(EVs)可功能性輸送生物貨物到受體細胞,是極具潛力的候選藥物輸送系統。然而,外源施用的EVs明顯缺乏靶細胞特異性,因此限制了它們的治療適用性。在這項研究中,為了提高EVs與腫瘤細胞相互作用,來自荷蘭烏得勒支大學醫學中心的研究者們開發了一種新的方法使EVs具有靶向特性。


      方法:EVs的產生細胞轉染了編碼抗表皮生長因子受體(EGFR)的納米抗體的載體,該納米抗體與DAF來源的錨定信號肽糖基磷脂酰肌醇(GPI)融合,從而嵌合在EVs的膜表面,可作為靶向腫瘤細胞的配體。EVs是用超濾/分子大小排阻液相層析分離并用Western blot,納米粒子追蹤分析和電子顯微鏡進行表征。 EVs與腫瘤細胞的相互作用使用2種方式分析,即靜態條件下的流式細胞術,和流動條件下的活細胞熒光顯微鏡耦合灌注系統。


      結果:EVs的分析表明,GPI連接的納米抗體被成功地表達在EVs的表面,并且與其來源的細胞相比EVs上得到高度富集。EVs的表面表達GPI連接的納米抗體并沒有改變總體EVs的特性(即形態、大小分布和蛋白質標記物表達),但大大提高了靜態條件下EVs與腫瘤細胞的結合,且與EGFR的密度相關。此外,在流動條件下,帶有納米抗體的EVs與表達EGFR的腫瘤細胞的結合也顯著提高。


      結論:研究表明,納米抗體可以通過GPI錨定在EVs的表面上,從而改變其細胞靶向行為。此外,該研究利用GPI錨定為EVs攜帶特定物質提供了新的方法,可以將各種蛋白質,例如抗體、報告蛋白和信號分子等攜帶到EVs的表面。

      Kooijmans, S. A., et al. (2016). "Display of GPI-anchored anti-EGFR nanobodies on extracellular vesicles promotes tumour cell targeting." J Extracell Vesicles 5: 31053


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